專用血清能為細胞提供必要的營養(yǎng)和生長因子,促進細胞生長和增殖,常被用于細胞培養(yǎng)、免疫學(xué)實驗、生物化學(xué)實驗以及藥理學(xué)和毒理學(xué)實驗等。在儲存時,通常需要將其置于-15℃至-20℃的環(huán)境中,以保持其活性和穩(wěn)定性。
專用血清在使用過程中可能會遇到問題,這些問題可能會影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。以下是幾種常見的問題及其相應(yīng)的解決方法。

1、沉淀現(xiàn)象
問題描述:
在儲存或使用過程中,有時會發(fā)現(xiàn)血清中出現(xiàn)不溶性的沉淀物。這通常不會影響質(zhì)量,但可能會引起擔(dān)憂。
解決方法:
適當(dāng)處理:輕微的沉淀可以通過緩慢解凍后輕輕搖晃來分散。如果沉淀較多,可以將血清加熱至56°C并持續(xù)30分鐘進行滅活處理,之后再通過過濾去除沉淀。
避免反復(fù)凍融:盡量減少血清的反復(fù)凍融次數(shù),因為每次凍融都會增加沉淀形成的可能性。
2、細胞生長不良
問題描述:
即使添加了適量的血清,細胞仍然表現(xiàn)出生長遲緩或形態(tài)異常的現(xiàn)象。
解決方法:
檢查血清質(zhì)量:確認所使用的血清是否符合預(yù)期的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),特別是內(nèi)毒素水平、總蛋白含量等關(guān)鍵指標(biāo)。
優(yōu)化培養(yǎng)條件:根據(jù)具體的細胞類型調(diào)整血清濃度,有時需要嘗試不同的比例以找到適合的條件。此外,確保培養(yǎng)環(huán)境(如溫度、pH值)處于良好狀態(tài)也很重要。
3、內(nèi)毒素污染
問題描述:
高水平的內(nèi)毒素會導(dǎo)致細胞毒性,抑制細胞增殖甚至導(dǎo)致細胞死亡。
解決方法:
選擇低內(nèi)毒素血清:在購買時優(yōu)先選擇經(jīng)過嚴格檢測且標(biāo)明低內(nèi)毒素水平的產(chǎn)品。
額外處理:如果懷疑存在內(nèi)毒素污染,可以考慮采用超濾或其他物理化學(xué)方法進一步降低內(nèi)毒素含量。
4、pH值不穩(wěn)定
問題描述:
某些情況下,它可能導(dǎo)致培養(yǎng)基pH值波動,影響細胞健康。
解決方法:
緩沖系統(tǒng)調(diào)整:使用適當(dāng)?shù)木彌_體系(如HEPES)可以幫助穩(wěn)定pH值。
定期監(jiān)測:定期檢查培養(yǎng)基的pH值,并根據(jù)需要調(diào)整CO2濃度或更換新鮮培養(yǎng)基。
5、微生物污染
問題描述:
盡管大多數(shù)商業(yè)化的產(chǎn)品都經(jīng)過嚴格的無菌處理,但仍有可能發(fā)生微生物污染的情況。
解決方法:
加強無菌操作:在處理血清及配制培養(yǎng)基時嚴格執(zhí)行無菌技術(shù),減少外界污染的風(fēng)險。
二次過濾:對于特別敏感的實驗,可以在加入細胞前對含血清的培養(yǎng)基進行0.2微米過濾除菌。
專用血清通過了解這些常見問題及其解決方案,研究人員可以更好地應(yīng)對在使用過程中遇到的各種挑戰(zhàn),從而保證實驗順利進行并獲得可靠的實驗結(jié)果。